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M900甘油-氨基氮分析仪



甘油-氨基氮分析仪



 
原理:采用特殊设计的甘油氧化酶膜电化学传感器对甘油浓度进行检测。仪器自动采集样本并导入至测试区域。样本中所含的甘油在固化的氧化酶的催化下发生酶解反应,反应产物为酸和过氧化氢。通过电极检测过氧化氢的含量从而计算出甘油含量。仪器通过对已知浓度的标准品进行定标,标准品的电压值是衡量样本乙醇浓度的尺度。未知浓度可与标准品的电压信号相比较而获得。每次测定完毕后,系统缓冲液会自动清洗传感器电极,清洗完成后即可进行下一次测试。

氨基氮:ISE离子选择性电极,检测铵根离子


仪器参数

参数指标 M900甘油-氨基氮分析仪
检测范围 甘油:0~2g/L、氨基氮:0.01-0.6g/L
分辨率 0.01g/L
系统误差 <1%
检测时间 20秒
定标方式 自动
进样方式 自动
数据导出 支持优盘Excel形式
通讯接口 RJ45 、RS232
酶膜检测次数 3000
单次检测成本 0.1元
检测结果输出 打印、数据库查询
储存容量 4000组
显示屏幕 10寸电容触摸屏
操作方式 交互式界面,触摸式
检测结果单位模式 g/L、mmol/L、mg/dl、%可选
样品盘 15个样品位


应用领域:生物制药、实验室研发、甘油、酒精发酵过程中甘油的检测。


应用案例

1)甘油在基因表达中的作用

毕赤酵母 ( Pichia pastoris) 作为一个越来越重要的表达系统,已成功应用于数百种外源蛋白的高效表达。 其表达外源蛋白的发酵过程一般有三个阶段:甘油相批培养 (glycerol batch culture) 、甘油流加培养 (glycerol fed2batch culture) 和外源蛋白表达又称为甲醇流加诱导培养 ( methanol fed2batch cul2ture) 阶段。 甘油流加培养阶段非常重要,一方面是为了是菌体在诱导前达到一定的酵母细胞生物量 ,另一方面是通过限制流加甘油补料,消耗批培养产生的如乙醇乙酸类 AOX 酶抑制剂的代谢物,从而有利于 AOX 酶启动子的诱导 ,为甲醇诱导作准备 ,使细胞从甘油相顺利向诱导相过渡。

2)准确检测甘油浓度的重要性

甘油补入速率的控制往往是一大困难 ,过慢补料使菌维持菌体所需能量相对增加 ,细胞生长减慢 ;补料过快则使得补入的碳源极易产生代谢物在发酵液中积累 ,有毒性 ,并且 ,高浓度的甘油还会抑制细胞生长。 另外 ,甘油相的补料时间最少得 1h ,也可在通过长时间甘油补料增加诱导起始细胞生物量,但是过高的细胞密度会引起细胞死亡率和蛋白酶增多,影响目的蛋白产量。

 

 

甘油常作为共基质,在甘油激酶、甘油磷酸脱氢酶和丙糖异构酶的作用下,转化为甘油醛-3磷酸,进入糖酵解途径并最终生成丙酮酸,其理论反应途径比葡萄糖更短,转化效率更高。甘油还可以作为可溶性酶体系的溶剂,使得脂肪酶活力更高、活性更稳定。在谷氨酸发酵时添加甘油,发现甘油不是作为碳源,而是作为保护剂增强细胞对环境的抵抗力和维持关键酶的活性,提高发酵的稳定性。

无机盐发酵培养基中的甘油浓度为 40 g/ L,实验证明在摇瓶和发酵罐中初始培养基中甘油浓度降低至 5 g/ L ,待甘油耗尽后及时补料 ,能很大程度上缩短毕赤酵母延滞期 ,促进毕赤酵母生长。补料分批发酵 ,培养基中甘油积累到一定程度会造成底物反馈抑制 ,使毕赤酵母生长速度放慢甚至停止生长 ,所以在流加过程中要控制甘油补加速度 ,使培养基中甘油浓度在限制性浓度以下。可以根据甘油分析仪的检测值 ,通过调节补料速度来精确控制甘油浓度。

(1) 在酿酒工业中的应用

葡萄酒是以葡萄为原料,经发酵酿制而成的发酵酒。在葡萄发酵过程中,会产生乙醇、甘油等物质。甘油让葡萄酒有一定的甜度,口感厚重圆润。甘油和乙醇的相对含量,受制于酿制工艺,是影响葡萄酒品质的重要因素。因此,可通过检测其甘油和乙醇含量来优化酿制工艺,提高葡萄酒的品质。

  

 

 

葡萄酒样品

1

2

3

酒精度,体积分数%

12.4

12.0

12.6

甘油,体积分数%

0.79

0.70

0.82


 


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